Glosario de términos de la materia

Adaptadores cortos
Oligonucleótidos sintéticos bicatenarios que pueden unirse a los extremos de fragmentos de ADN para originar sitios reconocibles por las enzimas de restricción.

ADN complementario (ADNc)
Cadena complementaria de ADN copiada a partir de una de ARN mediante la enzima transcriptasa inversa

ADN recombinante
Molécula de ADN que contiene segmentos de distintos orígenes (pueden ser biológicos o sintetizados químicamente). Para su generacion los segmentos de ADN se unen utilizando procedimientos de laboratorio

Agrobacteria
Género de bacterias del suelo que introducen genes ciertos vegetales mediante sus plásmidos.

Amplificación
Aumento del número de copias de un gen o de una secuencia de ADN.

Anticuerpo monoclonal
Anticuerpo producido por un clon de linfocitos B. A diferencia del policlonal, que es una mezcla de anticuerpos que reaccionan con diversos determinantes antigénicos, cada anticuerpo monoclonal posee una única especificidad.

Bandeado G
Técnica para ver un patrón de bandas en los cromosomas al teñirlos con Giemsa.

Bandeado Q
Técnica para ver un patrón de bandas en los cromosomas al teñirlos con quinacrina.

Biblioteca de ADN recombinante (genoteca)
Población de moléculas idénticas de vector en la que cada una de estas moléculas es portadora de un inserto de ADN diferente. En su conjunto, los diferentes insertos pueden representar un genoma completo (por ejemplo, una biblioteca genómica humana) o bien una colección de ARNs mensajeros aislados a partir de un tipo particular de célula y convertidos en los correspondientes ADNs complementarios (en cuyo caso se habla de una biblioteca de ADNc).

“Blotting”
Inmovilización de ADN, ARN o proteínas en una superficie de papel o membrana porosa para facilitar su estudio.

Cepa
En microbiología, conjunto de virus, bacterias u hongos que tienen el mismo patrimonio genético.

Clones
Grupo de células o de organismos de idéntica constitución genética entre sí y con el antepasado común del que proceden por división binaria o por reproducción asexual.

Clonación Celular
Proceso de multiplicación de células genéticamente idénticas, a partir de una sola célula.

Clonación De Genes
Técnica que consiste en multiplicar un fragmento de ADN recombinante en una célula-huésped (generalmente una bacteria o una levadura) y aislar luego las copias de ADN así obtenidas.

Clonación Molecular
IInserción de un segmento de ADN ajeno, de una determinada longitud, dentro de un vector que se replica en un huésped específico.


Conjugación
Uno de los procesos naturales de transferencia de material genético de una bacteria a otra, junto con la transducción y la trasformación, realizado por contacto entre ellas.

Clon (del griego klon= pequeña rama, vástago)
Población de organismos, células, virus o moléculas de ADN derivados de la replicacíón de un único progenitor genético.

Clonaje o clonación
Procedimiento que permite la obtención de un clon.

Cósmido
Vector artificial, constituido por un plásmido y por las secuencias cos del fago lambda, que permite clonar secuencias de ADN muy largas.

Cromosomas artificiales de levadura (CAL o YAC, del inglés “yeast artificial chromosomes”)
ADN recombinante que posee secuencias que permiten su mantenimiento en células de levaduras y hace posible la clonación de regiones muy grandes de ADN.

Desnaturalizar
Alterar el estado natural de los ácidos nucleicos o de las proteínas. La desnaturalización del ADN o del ARN desenrolla y separa las dos hebras de una doble hélice o rompe la estructura secundaria monocatenaria.

Desnaturalización De Proteínas
Proceso por el cual una proteína pierde la forma nativa. Una proteína se puede desnaturalizar por calor, cambios en el pH del medio, presencia de detergentes, etc.

Diagnóstico Génico
Técnica de localización e identificación de la secuencia de un determinado gen para establecer su normalidad o malformación. Permite predecir en ausencia de síntomas, en algunos casos la existencia de enfermedades congénitas, y, en otros, los factores ambientales de riesgo que las provocarán.

Diferenciación
Conjunto de procesos por los que las células adquieren las características propias de las células adultas.

“Dot blot” (hibridización sobre mancha)
Técnica que permite diferenciar si una muestra biológica contiene una secuencia de ácido nucleico concreta. Para ello se enfrenta directamente la muestra con una sonda marcada cuya secuencia reconocerá y se unirá específicamente al ADN en cuestión.

Electroforesis.
Método de separación de moléculas consistente en someter la mezcla a un campo eléctrico de manera que las moléculas migrarán más o menos según su tamaño y su carga eléctrica. Se puede utilizar para separar o purificar proteínas o fragmentos de ARN o ADN.

Electroforesis en gel con campo pulsante (EGCP o PFGE, del inglés
“pulsed field gel electrophoresis”)
Técnica electroforética para separar moléculas de ADN muy grandes mediante la alteración periódica de la dirección del campo eléctrico a través del cual migran las muestras.

Electroporación
Técnica consistente en someter las células a un choque eléctrico con el fin de aumentar la permeabilidad de sus membranas y permitir la entrada de moléculas de gran tamaño como proteínas o genes

Endonucleasa de restricción (ver restrictasa)
Enzima que corta las moléculas de ADN en lugares con secuencias específicas de nucleótidos.

ES (células)
Embryo-derived stem cells. Células embrionarias no diferenciadas. Pueden cultivarse in vitro de manera prolongada y modificadas genéticamente. En un ratón, por ejemplo, una vez implantadas en un embrión contribuyen a la formación de un individuo-quimera que puede transmitir genéticamente la modificación a su descendencia.

Extremos cohesivos
Terminaciones de las monohebras de ADN ocasionadas por acción de ciertas endonucleasas de restricción, originando unas secuencias en tales terminaciones que facilitan la unión de dichos extremos en moléculas diferentes.

Extremos romos
Extremos no cohesivos de una molécula de ADN dúplex (las dos cadenas poseen la misma longitud) .

Fermentación
Conversión biológica anaeróbica (sin oxígeno) de las moléculas orgánicas, generalmente hidratos de carbono, en alcohol, ácido láctico y gases, mediante la acción de ciertos enzimas que actúan bien directamente o como componentes de ciertas bacterias y levaduras. En su uso más coloquial, el término hace referencia a menudo a bioprocesos que no están estrictamente relacionados con la fermentación.

Gen reportero (informador)
Gen que codifica un producto que puede ser medido con facilidad al introducirlo, por transfección, en una célula.

Heterodúplex
Molécula de ADN de doble cadena, formada por hibridación de cadenas sencillas complementarias, de diferentes orígenes. Sólo las secuencias de ADN homólogas o complementarias pueden formar regiones de doble cadena, mientras que las secuencias de ADN no complementarias quedan como cadenas sencillas y son visibles como tales en el microscopio electrónico.

Hibridación
Proceso por el cual dos hebras sencillas complementarias de polinucleótidos se asocian para formar una doble hélice.

Hibridación “in situ” con fluorescencia (HISF o FISH, del inglés “fluorescence in situ hybridization”)
Técnica para visualizar sitios en cromosomas que se hibridan con sondas específicas de nucleótidos, marcadas por fluorescencia.

Hibridoma
Célula híbrida. Se obtiene fusionando células plasmáticas con células de mieloma (cancerosas) que tienen la capacidad de crecer y dividirse continuamente.

Huella de ADN (“ADN fingerprint”)
Patrón de fragmentos de ADN de una región particular de un genoma, obtenido con una nucleasa de restricción particular. Los fragmentos se separan mediante electroforesis en gel y dependiendo de la secuencia particular de ADN que se examina, el patrón puede ser exclusivo de cada individuo de la especie.

Huésped
Animal o vegetal que alberga o nutre otro organismo (parásito). En manipulación genética, organismo de tipo microbiano, animal o planta cuyo metabolismo se usa para la reproducción de un virus, plásmido o cualquier otra forma de ADN extraño a ese organismo y que incorpora elementos de ADN recombinado.

Inserto de ADN
Segmento de ADN unido a un vector de ADN recombinante para su clonaje.

Knockout (noqueado, poner fuera de combate)
Capacidad de eliminar un gen específico en una célula o un organismo por medio de técnicas moleculares.

Línea celular
Clon celular bien definido que puede perpetuarse en cultivo, durante muchas generaciones e, incluso, indefinidamente.

Liposomas
Vesícula esférica artificial constituida por dos o mas capas de lípidos. Los liposomas se están utilizando como vector de genes.

Mapa de restricción.
Conjunto de puntos de corte, que un ADN (desde el de un plásmido hasta un cromosoma entero) tiene para un conjunto de endonucleasas de restricción.

Mapa genético
Determinación del orden lineal de los genes a lo largo de un cromosoma.

Mapa molecular
Establecimiento del orden lineal de segmentos de ADN a lo largo de un cromosoma.

Mapeo génico
Elaboración de un mapa de los diferentes loci génicos sobre la base de la posición física de unos con respecto a otros.

Medio De Cultivo
Conjunto de substratos, minerales, factores de crecimiento y vitaminas que se usan para el cultivo de microorganismos (bacterias, levaduras, etc.) o líneas celulares derivadas de animales y plantas.

Microinyección
Técnica que permite introducir en una célula un gen en solución, gracias a una micropipeta y bajo microscopio.

Microsatélites
Semejantes a los minisatélites, pero con un tamaño alélico menor, en el rango de dos a cuatro nucleótidos. En el genoma humano existen varias decenas de miles, presentándose aproximadamente uno por cada 100.000 p.b.

Minisatélites
Variaciones en la cantidad de secuencias de ADN repetitivas en tándem que aparecen en loci específicos en diferentes poblaciones. Su tamaño suele ser de 10-30 p.b. En el genoma humano aproximadamente existe uno por cada 1.000.000 p.b.

Molde
Cadena de ARN o de ADN que es utilizada para dirigir el orden de fijación de los nucleótidos en una nueva cadena polinucleotídica por apareamiento de bases complementarias.

Mutación
Cambio transmisible en una secuencia de nucleótidos que conduce a una alteración o la pérdida de la función normal codificada por esa secuencia de nucleótidos.

Nick Traslation
Método que permite reemplazar nucleótidos de ADN de doble cadena por otros idénticos marcados, mediante tratamiento con ADNasa I y posterior repartición con ADN-polimerasa. Ambas cadenas son marcadas con esta técnica.

Northern blot
Véase transferencia Northern

Nucleasa
Enzima que degrada específicamente moléculas de ácidos nucleicos.

Organismo transgénico
Animal o planta cuyo genoma ha sido modificado por la introducción de nuevas secuencias de ADN, de modo que la descendencia de ese organismo heredará las nuevas secuencias.

Origen de replicación
Sitio específico del ADN en el cual se inicia su replicación.

Palíndromos
Fragmento de dos cadenas de ADN en que las bases complementarias de la doble hélice están ordenadas según una simetría rotacional. Constituyen el sustrato de las endonucleasas de restricción que rompen la molécula en el entorno del eje de simetría y en ambas cadenas. Son segmentos capicúas que resultan iguales vistos en uno u otro sentido. Como el capicúa alfabético anilina.

Paseo Genómico (“genome walk”)
Obtención de un mapa de las secuencias del ADN genómico alrededor de un segmento clonado, utilizando los extremos de éste como sondas para clonar (usualmente de una biblioteca) las regiones contiguas de ADN que se solapan con él.

PCR (del inglés “polymerase chain reaction). Reacción en cadena de la polimerasa
Sistema de amplificación genética que permite obtener millones de copias de un determinado fragmento de ADN o ARNm del que simplemente se conozcan dos secuencias que lo flanqueen.

PCR con cebadores alelo específicos.
Sistema de PCR que, debido al cebador utilizado, permite la amplificación de un alelo específico individual.

Plásmido (o episoma)
Molécula de ADN cerrada, circular, que se multiplica de forma autónoma en la célula y puede pasar de unas células a otras. Es bastante común en las bacterias. Muchos plásmidos, modificados genéticamente, se utilizan como vectores en la clonación molecular.

Polimorfismo de longitud de fragmento de restricción (PLFR o RFLP, del inglés “restriction fragment length polymorphism”)
Variaciones, heredables, en la longitud de los fragmentos de ADN de una región específica obtenidos por acción de enzimas de restricción. Se deben a la aparición o desaparición de dianas de restricción en las secuencias del ADN.

Polimorfismos genéticos
Existencia de múltiples variantes de un gen (y por tanto de la proteína que codifica). En el ADN humano, aproximadamente 1 de cada 500 nucleótidos es polimórfico (varía de un individuo a otro).

Primer (o iniciador). Véase cebador.

Radioautografía
Detección de moléculas marcadas radiactivamente sobre película de rayos X.

Reacción en cadena de la polimerasa. Véase PCR.

Reacción en cadena de la polimerasa con transcripción inversa (RT-PCR, del inglés ”reverse transcription-polymerase chain reaction”)
Amplificación de ARN mediante PCR tras copiarlo como ADNc por medio de transcripción inversa.

Recombinación
Intercambio de uno o varios fragmentos de ADN entre dos moléculas distintas de manera que las resultantes poseen secuencias de las dos originales. La recombinación génica se produce de forma natural en varias situaciones, como es la generación de las células sexuales.

Recorrido cromosómico
Secuenciación de fragmentos de ADN clonado en una dirección a lo largo del cromosoma. (caminata genomica)

Repeticiones en tándem de número variable (RTNV o VNTR, del inglés “variable number tandem repeats”). Véase Minisatélites.

Repeticiones terminales largas (RTL o LTR, del inglés “long terminal repeat”)
Secuencias bicatenarias de ADN, generalmente de varios centenares de pares de bases de longitud, que están repetidas en los dos extremos del ADN de los retrovirus y de los retrotransposones.

Restrictasa
Enzima de restricción que corta el ADN por secuencias específicas (generalmente fragmentos de 6 bases) y que origina extremos romos o cohesivos.

Secuencia de ADN
Orden de encadenamiento de las bases nitrogenadas de los nucleótidos que constituyen el ADN y que cifra toda la información genética. Cuando es codificante (exón), define el orden de los aminoácidos que forman la proteína correspondiente.

Secuencia señal
Secuencia de aminoácidos que orienta una proteína hacia un sitio celular específico.

Sistema de mutación refractario a la amplificación (SMRA o ARMS, del inglés “amplification refractory mutation system”). Véase PCR con cebadores alelo específicos

Sonda
Segmento de ADN o de ARN marcado radioactivamente (o con algún grupo químico detectable fácilmente), utilizado para detectar secuencias de ácidos nucleicos complementarios mediante hibridación.

Southern blot
Véase Transferencia Southern.

Terapia Génica
Conjunto de los procesos destinados a la introducción in vitro o in vivo de un gen normal en células, germinales o somáticas, en las que el mismo gen, anormal, provoca una deficiencia funcional, origen de una enfermedad, o la de un gen codificador de una proteína, por ejemplo, con una acción antitumoral en las células cancerosas, o antivírica en células infectadas por un virus patógeno.

Totipotencia
Capacidad de una célula para originar un organismo completo.

Transcriptasa reversa
Enzima que copia una secuencia de nucleótidos de ARN a una de ADN.

Transducción
Transferencia de material genético entre bacterias, mediante la participación de un fago, sin que éstas entren en contacto.

Transfección
Proceso por el que un gen o un fragmento de ADN foráneo es transferido o introducido en una célula.

Transferencia Northern
Técnica que transfiere moléculas de ARN, después de su fraccionamiento por tamaños en geles, a membranas nitrocelulósicas para su hibridación con sondas específicas.

Transferencia Southern
Técnica que transfiere moléculas de ADN, después de su fraccionamiento por tamaño en geles, a membranas nitrocelulósicas para su hibridación con sondas específicas.

Transferencia Western
Técnica que transfiere moléculas proteicas, después de su fraccionamiento por tamaño en geles, a membranas nitrocelulósicas para su análisis con anticuerpos.

Transformación
Conjunto de cambios que una célula sufre cuando se convierte en cancerosa. También se aplica a las bacterias cuando incorporan un gen exógeno.

Transgén
Gen que se introduce en una célula o en un individuo de forma artificial.

Translocación
Cambio en la ubicación de un determinado fragmento de material genético.

Vector
Molécula de ADN que puede unirse a un segmento de ADN de distinto origen y que puede ser introducida después en una célula en la que es capaz de replicarse.

Vector de expresión
Vector de ADN recombinante diseñado para permitir la transcripción y la traducción de secuencias codificantes contenidas en segmentos de ADN insertados.

Vector lanzadera (Shuttle/transbordador)
Vector de ADN recombinante que puede replicarse en las células de más de una especie.

Vector suicida
Vector de ADN recombinante diseñado para que no pueda replicarse, siendo capaz de integrar una parte de su material genético en el ADN genómico, generalmente por recombinación homóloga.

Vntr
Ver Repeticiones en tándem de número variable.

Western blot
Véase Transferencia Western